pLVX-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
啟動(dòng)子CMV
復(fù)制子pUC
終止子SV40 poly（A） signal
質(zhì)粒分類病毒系列，慢病毒克隆質(zhì)粒
質(zhì)粒大小8102bp
原核抗性Amp
篩選標(biāo)記Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主哺乳細(xì)胞
誘導(dǎo)方式無須誘導(dǎo)，瞬時(shí)表達(dá)
5'測(cè)序引物CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'測(cè)序引物根據(jù)序列設(shè)計(jì)引物

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注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；

2、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記；

3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；

4、42℃熱激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；

6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；

7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；

8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；

9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒

pLKO.1-PMP22shRNA2基因沉默質(zhì)粒

pLKO.1-PMP22shRNA4基因沉默質(zhì)粒

pCS2-EGFP-MCS-3×FLAG蛋白表達(dá)質(zhì)粒

pFUGW-H1基因沉默質(zhì)粒

pBV220-Cam蛋白表達(dá)質(zhì)粒

pTrc99a-Kan蛋白表達(dá)質(zhì)粒

pLentiCRISPRV2-ANO6(mouse)-sgRNA3基因編輯質(zhì)粒

pLentiCRISPRV2-TRPC1(mouse)-sgRNA3基因編輯質(zhì)粒

pLentiCRISPRV2-NANOG(human)-sgRNA1基因編輯質(zhì)粒

pCAG-VSVP輔助包裝質(zhì)粒

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