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        我的位置:首頁  >  產品中心  >  質粒菌株  >  質粒  >  P74540pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo
        pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo
        • 產品型號:P74540
        • 廠商性質:生產廠家
        • 更新時間:2025-07-17
        • 訪  問  量:458
        簡要描述:

        名稱pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo
        別稱XM_021090459.1;
        質粒宿主哺乳細胞
        質粒用途蛋白表達

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        產品詳情

        名稱pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo
        別稱XM_021090459.1;
        基因長840bp
        質粒宿主哺乳細胞
        質粒用途蛋白表達
        片段類型ORF
        片段物種
        原核抗性Amp
        篩選標記Neo/G418
        啟動子CMV
        復制子pUC
        感受態DH5a
        溫度37度
        背景載體pCMV-T7-3×FLAG-MCS-Neo
        正向引物CMV-F

         


        注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。


        1
        、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

        2
        、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

        3
        、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

        4
        42熱激90s,再冰浴2min

        5
        、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

        6
        6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

        7
        、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

        8
        、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

        9
        、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒


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