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一、載體構建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產物的轉化;
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結果交付
二、詳細內容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建,如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體;報告基因載體等;
2、基因定點突變,包括單點突變,多點突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建;
5、過表達載體構建。
| pMES4基因模板質粒 |
| pET22b-Ag43蛋白表達質粒 |
| pLentiCRISPRV2-SQSTM1-sgRNA1(human)基因編輯質粒 |
| pUC57-H19-m基因模板質粒 |
| pLVML-3×FLAG-RALY-SA-IRES-Puro蛋白表達質粒 |
| pCDH-NFAT-Luc2-T2A-tdTomato蛋白表達質粒 |
| pLVX-WTAPshRNA1-EGFP(2A)Puro基因編輯質粒 |
| pLVX-HCAR1shRNA1-EGFP(2A)Puro基因編輯質粒 |
| pET28a-(-30)GFP-PARK7蛋白表達質粒 |
| pLVX-P62-FLAG-Puro蛋白表達質粒 |

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