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一、載體構(gòu)建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結(jié)果交付
二、詳細內(nèi)容
1、以PCR擴增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體;報告基因載體等;
2、基因定點突變,包括單點突變,多點突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達載體構(gòu)建;
5、過表達載體構(gòu)建。
| pLVX-TRE3G蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-AcGFP1-C1蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-EF1α-IRES-EGFP-PGK-Puro蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-Tight-Puro蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-DsRed-Monomer-N1蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-AcGFP1-N1蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-10×His-Puro蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-Myc-MCS-Strep-IRES-Puro蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-EF1a-IRES-mCherry蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-IRES-mCherry蛋白表達質(zhì)粒 |
| pLVX-IRES-Neo蛋白表達質(zhì)粒 |

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